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蘇木精(hematoxylin)和伊紅(eosin)染色方法,簡稱HE染色方法,是細(xì)胞與組織學(xué)最廣泛的染色方法。

一、HE 染色的基本原理

(一)細(xì)胞核染色的原理

細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩邊鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

(二)細(xì)胞漿染色的原理

細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),胞漿對外不顯電性,此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染我以,現(xiàn)時(shí)胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把 pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被感染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比。

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